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噬菌体展示文库
噬菌体展示是一种能在丝状噬菌体表面呈现短肽、蛋白质或抗体分子的强大技术，可用于对靶标特异性结合分子的高通量筛选。云舟生物专注于构建高质量的噬菌体展示文库，包括短肽文库和抗体展示文库可为您的药物研发、疫苗开发以及蛋白质相互作用研究提供有力支持。
亮点
可构建多种类型的合成或天然噬菌体展示文库，包括短肽、VHH、Fab、以及scFV展示文库。
经过NGS验证的高复杂性(109-1010)且高均一性文库。
高滴度噬菌体文库(>1013 PFU/ml)。
抗体筛选服务可通过我们专有的高通量亲和力测量方法进行简化。
服务详情
价格与周期
| 服务模块 | 简介 | 价格（CNY） | 周期 |
|---|---|---|---|
| 文库设计 | 我们的服务流程始于咨询环节，专家团队将根据您的需求协助您设计合适的文库。我们可全程指导您完成您感兴趣的多肽、蛋白质或抗体的文库构建方案。 | 免费 | 1-3 天 |
| 准备序列变异体 | 序列变异体可通过从头合成或者从未免疫/免疫动物中获取。 | 请咨询 | |
| 噬菌体文库构建 | 我们通过大规模平行克隆将变异序列导入目标载体（噬菌体载体或噬菌粒载体），并采用 Sanger测序对质粒文库质量进行初步评估。 完成组装（无论是否使用辅助噬菌体）并高效扩增噬菌体后，高滴度的噬菌体文库(>1013 PFU/ml) 将以干冰方式发送给您的实验室，或您也可以继续采用我我们的下游筛选实验服务。 | 请咨询 | 3-5 周* |
| NGS验证 | 我们为文库构建提供的NGS验证服务以评估文库的复杂性和均一性。 | 请咨询 | 1-3 周 |
| 文库筛选 | 我们提供的VHH抗体发现可使用羊驼来源的基于序列的筛选技术，并包括下游特征分析和优化等服务。 | 请咨询 | |
*以上的周期时间信息适用于复杂度为109的文库构建项目。当需要构建超高复杂度的文库(比如1010)时，需要额外的1-2周时间。
技术详情
云舟生物可构建短肽展示文库与抗体展示文库（如VHH、Fab、scFv）。这两类文库对于展示分子的大小和复杂度、载体骨架以及噬菌体组装方法上存在差异。
变异体来源
待展示的变异体可通过从头合成的方式或者从未经免疫/已免疫的动物获取。下表汇总了这些不同来源方式的关键特点：
| 从来源区分文库类型 | 描述 | 关键特点 | 优势 |
|---|---|---|---|
| 天然文库 | B细胞从未经免疫的健康动物体内分离，抗体序列专门通过PCR从cDNA中扩增。 |
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| 免疫文库 | B细胞来源于预先暴露于特定抗原的免疫动物体，抗体序列专门通过PCR从cDNA中扩增。 |
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| 从头合成文库 | 完全为人工合成；可以是确定的序列或者包含简并核苷酸的序列 |
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文库骨架
两种噬菌体展示文库之间的另一个关键区别在于载体骨架的选择。
用于短肽展示的M13噬菌体载体
源于细菌噬菌体的载体，如M13KE噬菌体载体，通常用于短肽展示（最长50个氨基酸）。M13噬菌体的DNA以单链DNA形式包含完整的噬菌体基因组，其中约半数基因编码以衣壳蛋白（G3P、G6P、G7P、G8P和G9P），其余基因则对基因组复制、噬菌体组装和噬菌体释放过程至关重要（图1A）。
图1（A）M13KE载体的载体图谱。（B）在重组噬菌体表面展示短肽。
在该系统中，目的短肽将与噬菌体外壳蛋白G3P连接形成融合蛋白，然后被展示在噬菌体表面。这种方法相当适用于短肽的亲和力分析以及对高亲和力结合分子进行高效筛选（图1B）。将载体导入宿主E. coli细胞后，可实现重组噬菌体颗粒的组装与扩增，并最终获得高滴度的噬菌体展示文库。由于这些噬菌体载体包含完整的噬菌体基因组，因此无需辅助噬菌体即可产生功能完备的噬菌体颗粒。
用于抗体展示的噬菌粒载体
pComb3x及类似的噬菌粒载体常用于抗体展示文库构建（图2A）。pComb3x噬菌粒包含一个噬菌体外壳蛋白（如G3P）基因，该基因与外源DNA序列融合，可实现抗体片段或全长抗体的噬菌体表面展示（图2B）。然而，噬菌粒缺乏噬菌体组装所需的结构基因和复制基因，因此无法自主产生噬菌体颗粒。需借助辅助噬菌体提供缺失的噬菌体基因，重组噬菌体颗粒才能完成包装并被分泌。
图2 （A）pComb3x嗜菌粒载体的载体图谱。（B）在重组噬菌体表面展示抗体。
客户提供材料
如需提供客户材料，请联系我们了解外来物品接收指南。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测，每一份材料附加检测费用。请注意，客户提供的材料接收并通过QC之后生产才正式开始。对于客户提供的预制质粒文库，我们无法保证文库的多样性和均一性。
常见问题解答
这些文库采用M13KE载体构建，其中包含了完整的噬菌体基因组。因此每个噬菌体上的所有G3P蛋白都会与单价或多价肽段融合，而这增加了噬菌体系统的结构和功能限制。我们建议将展示的肽段长度控制在25个氨基酸以下。超过50个氨基酸的肽段或蛋白质会增大融合蛋白的尺寸，从而影响噬菌体高效感染大肠杆菌的能力并进而干扰文库中噬菌体的增殖与筛选过程。
较短的肽段在噬菌体展示文库中具有显著的优势：更容易合成并表达可以降低生产的复杂度；同时，短肽在精准设计其特异性的同时还能保持稳定性和功能性，因此特别适用高亲和力结合实验以及疗法开发项目。这些优势促使短肽在配体发现、受体研究和治疗靶点验证等应用中具有出色的表现。