- 腺相关病毒
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冠状病毒解决方案
重组AAV病毒近年来已成为用于基因治疗和疫苗开发的热门基因递送载体。在早期临床研究中,为测试AAV载体在体内的可靠性和安全性,一个关键的问题便是需要鉴定其在多种器官和组织中的分布情况与留存时长。
目前虽有一些研究报道了常用血清型的 AAV的组织分布模式,但是这些研究提供的数据量上还未能达到临床应用的要求。现今的AAV组织分布鉴定方法通常仅具有器官水平的分辨率,而没有深入到亚器官水平上的不同细胞类型。而且这些研究通常只专注于使用静脉注射的方式输送AAV,同时缺乏其它给药途径的尝试。此外更显著的问题是,当前大多数实验都是在啮齿类动物身上进行的,而这些动物由于与人类在进化和生理上高度差异,从这些动物获得的数据结果令人怀疑是否同样适用于人类。当前许多新开发血清型,包括天然的和人工合成的,完全缺乏详细的组织分布数据。令这些问题更复杂的是,鉴于不同的转基因在体内会引发有差异性的细胞反应,如先天免疫反应,即使是包装成相同血清型的不同转基因载体也会具有不同的组织分布模式。
载体家提供的AAV组织分布鉴定服务将有助于克服以上的问题,为您获得特定物种的高分辨率的AAV组织分布图像。值得一提的是,我们还可以在非人灵长类(Non-human primate,NHP)中进行该实验。从小鼠模型到猴模型,我们提供的是当前产业界物种跨度最完整的AAV组织分布鉴定服务。
点击主页上的“发送需求咨询”按钮在线提交您的需求,我们的技术人员会向您发送包含价格、周期和其他相关信息在内的服务方案。
以下数据为我们测试的不同血清型AAV在多种组织中的分布情况:
图1 小鼠多种方式注射AAV9-CAG-EGFP,对多种器官组织取材、制备冷冻切片,激光共聚焦显微镜观察:(A)内耳,左耳鼓室内注射后第13天;(B)海马和脊髓前角,面静脉注射后第10天;(C)视网膜、肝、胰腺和骨骼肌,尾静脉注射后第12天。
图2 小鼠尾静脉注射AAV1-CMV-EGFP。注射后第12天,处死取材,制备冷冻切片。激光共聚焦显微镜观察。
图3 小鼠视网膜下注射AAV8。注射后第20天,处死取材,制备冷冻切片。激光共聚焦显微镜观察。(A)AAV8-ProA1-mCherry(B)AAV8-hRHO-EGFP。
图4 向出生48小时的新生鼠(2只雄性、1只雌性)静脉注射AAV9(~1.5x1010 GC)。注射第六周后,qPCR检测小鼠各个器官中的AAV拷贝数。