SERVICES

昆虫杆状病毒包装

昆虫杆状病毒(Insect baculovirus)被广泛用于在昆虫细胞和哺乳动物细胞中表达重组蛋白。它是一种多功能的有效的重组蛋白真核表达系统,能让重组蛋白具有真核生物特异性的翻译后修饰(与细菌表达的重组蛋白不同,细菌表达的重组蛋白不具有真核修饰)。我们开发出一系列专有技术和试剂,从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面显著提升了杆状病毒包装工艺水平,对于在我们载体构建服务中用到的杆状病毒载体尤其如此。因此,结合我们的线上载体设计平台、线下载体和病毒生产线,我们能持续地提供高质量的定制化杆状病毒产品。

阅读我们的杆状病毒转移载体系统的详细介绍 >>
查看我们的杆状病毒转移用户推荐 >>
如何获取昆虫杆状病毒包装服务?
查看一个杆状病毒载体设计案例 >>
查看一个杆状病毒服务协议案例 >>
查看设计载体说明 >>
查看下单说明 >>
昆虫杆状病毒类型

我们提供仅适合昆虫细胞表达的AcMNPV杆状病毒包装服务。AcMNPV全称为Autographa californica multicapsid nucleopolyhedrovirus,中文名称为苜蓿银纹夜蛾多囊核多角体病毒。

价格和周期

由于技术上的优势,我们的杆状病毒包装具有更高的质量、更高效、更实惠。不同规格的杆状病毒包装价格和周期如下所示:

规格 推荐使用 滴度 & 体积* 价格 (CNY) 周期**
中规格 细胞培养 >106 PFU/ml,10x 100 ul,DPBS 缓冲液 ¥4600 7-14天
大规格 细胞培养 >107 PFU/ml,10x 100 ul,DPBS 缓冲液 ¥7700 7-14天

*周期是指订单接收到发货之间的时间,不包括需要客户提供任何物料(如病毒载体)的等待时间。

交付内容

如果您选择中规格和大规格的杆状病毒包装,每个订单交付内容如下:

  • 所选规格的定制病毒
  • 免费:少量对照病毒*

* 对照病毒的设计与定制化病毒的生物学应用相匹配,并用于转导测试。例如,如果定制化的病毒过表达一个基因,则提供的对照病毒表达荧光蛋白EGFP。对照病毒详细信息如下表所示:

对照载体名称 对照载体ID 定制化病毒包装规格 对照病毒数量 价格 (CNY)
pBV-EGFP VB170317-1029uux 中规格 >106 PFU/ml,2x 100 ul,DPBS缓冲液 免费
大规格 >106 PFU/ml,2x 100 ul,DPBS缓冲液 免费
生产、纯化和滴定

我们常规使用的昆虫杆状病毒包装系统包括一个重组Bacmid和一株昆虫细胞。包装前,将携带目的基因(Gene of Interest, 简称GOI)和Tn7转座位点的转移载体(Transfer vector)转化到特定大肠杆菌里,此菌株含有一个表达Tn7转座酶的辅助质粒(helper plasmid)和一个含有杆状病毒基因组序列的大质粒(即bacmid,约136 kb,在杆状病毒序列中有Tn7转座位点)。在该细菌里,转移载体上的目的基因转座到bacmid上,形成携带目的基因的重组bacmid。包装时,将重组bacmid质粒DNA转染昆虫细胞Sf9。短暂孵育后,从培养上清中收集病毒颗粒。对于大规格包装,采用蔗糖离心进一步浓缩。我们采用基于qPCR的方法测定昆虫杆状病毒的滴度。

质量控制

对于每一个我们生产的杆状病毒,质量控制均包括滴度测定(Titer determination)、微生物(细菌和真菌)检测(Bioburden test)、支原体检测(Mycoplasma test)。若转移载体同时编码一个荧光蛋白,我们还会将病毒进行细胞转导以测定相应的荧光表达情况(Transduction test)。

客户提供载体

如需客户提供杆状病毒载体,则请按照外来物品接收指南将载体寄送给我们。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测,每一份材料附加检测费用。请注意,客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始。

问题

常见技术问题请参见常见问题。有关我们产品和服务的其他更多信息,请按照此处联系方式咨询载体家服务团队。