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重组蛋白表达
云舟生物提供的重组蛋白表达服务采用多种表达平台，适用于多类应用场景，包括蛋白质结构分析、酶活测定、药物开发、医学诊断以及生物工程等。我们的定制重组蛋白表达载体和蛋白表达流程经过高度优化，可生产高质量的重组蛋白。此外，我们还可以接收客户提供的载体用于生产重组蛋白。
亮点
- 一站式解决方案： 从载体设计到大规模重组蛋白生产
- 综合性平台： 可灵活选择多种表达系统
- 定制化服务： 直观易用的线上载体设计平台上可自由添加各种蛋白标签
- 高质量： 可提供多种类型的纯化方法以及质量控制项目
重组蛋白表达系统
重组蛋白表达的一般流程
常见问题解答
每一种重组蛋白表达系统都有其优缺点。您需要根据您的项目选择最合适的系统。下表对比了不同蛋白表达系统的特点。
| 重组蛋白表达系统 | 优势 | 不足 |
|---|---|---|
| 细菌 |
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| 哺乳动物细胞 |
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| 昆虫细胞 |
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| 无细胞系统 |
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重组蛋白的生产常需要对蛋白添加标签。这些标签通常可以简化纯化过程，改善蛋白质水溶性、产量或纯度。如果标签设置有蛋白酶酶切位点，则可以在纯化后将其去除，而酶切的效率因目标蛋白质而异。选择适当的标签对于蛋白的表达和纯化至关重要。下表概述了常用的蛋白标签及其优缺点。
| 标签类型 | 常用系统 | 优势 | 不足 |
|---|---|---|---|
| GST | 细菌、昆虫细胞 |
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| His | 全部 |
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| SUMO | 细菌、昆虫细胞 |
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| Flag | 哺乳动物细胞、昆虫细胞 |
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| MBP | 细菌、昆虫细胞 |
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| Fc | 哺乳动物细胞、昆虫细胞 |
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云舟生物克隆的所有载体都保证100%的序列准确性。云舟生物生产的所有重组蛋白均经过严格的质量控制（QC）。对于大多数系统，默认的质量控制包括：（1）酶切分析和Sanger测序验证蛋白质表达载体；（2）通过A260/280测量和SDS-PAGE确定蛋白质的浓度和纯度。下表列出了常见的额外QC项目服务。这些服务可根据具体需求提供。
| 额外QC项目 | 方法 |
|---|---|
| 内毒素检测 | LAL |
| 蛋白鉴定 | Western Blot |
| Intact MS (reduced) | |
| SEC-HPLC | |
| SEC-MALs | |
| 蛋白N端测序 | |
| 宿主蛋白检测 | |
| 标签去除 | 蛋白酶消化 |
| 动力学和亲和性分析 | Octet |
| Biacore | |
| 针对啮齿类动物的病原体检测 | |
云舟生物提供多种蛋白质纯化方法，包括尺寸排阻色谱（凝胶过滤）、亲和色谱、离子交换色谱和疏水相互作用色谱。对于带有His标签或GST标签的重组蛋白，通常使用亲和色谱，而对于无标签的重组蛋白，通常使用尺寸排阻色谱法（凝胶过滤）。纯化方法将基于构建的载体设计和蛋白质特性进行选择。