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- VB UltraStable™ 化学感受态细胞
冠状病毒解决方案
细菌在特定状态下可吸收环境中的DNA,这种状态称之为感受态(competence)。自然条件下的细菌吸收外源遗传物质可适应外界不良环境的影响,但并非所有类型的菌株均有此能力。大肠杆菌(E. coli)是实验室常用细菌类型。处于对数生长期的大肠杆菌更容易形成感受态。为了满足实验需求,人们通常使用理化方式诱导工程菌菌株产生感受态, 可以更有效地控制外源DNA的导入。常用转化方法有化学和电转两种(chemical transformation and electroporation)。对一般克隆实验来讲,化学转化实验操作起来更简易,不需要电转设备和耗材。
VB UltraStable™ 化学感受态细胞(chemically competent cells)产品中的阳离子(cation)能中和细胞膜表面负电荷与质粒DNA分子自带的负电荷,从而减少两者之间的互斥作用,让两者的接近更加容易。此外,被中和了的质粒DNA由于分子内缺少了负电荷排斥力,更倾向折叠成球型结构,而不是线性形态,更容易通过细胞膜。低温处理有助于降低细胞膜流动性,并使得膜表面的LPS(O-polysaccharide)整齐排列,让质粒DNA更容易附着于细胞膜。一旦DNA附着于膜表面,此时热激,细胞膜流动性增加,附着的质粒DNA分子进入细胞内。此时再次低温处理,细胞膜流动性再次降低,胞内的质粒DNA分子被锁住。
VB UltraStable™ 化学感受态细胞是一款经过优化的高转化效率产品,突变了合成LPS的galE基因,使其LPS变少,更容易捕获DNA,转化效率可达>109 cfu/ug。
特点
菌种类别
E.coli K-12
基因型
F’[∆ccdAB proAB+ lacIq lacZ∆M15 zzf::Tn10 (TetR)] recA1 endA1 fhuA mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZ∆M15 ∆(ara, leu)7697 araD139 ∆lacX74 galK16 galE15 e14- relA1 nupG rpsL (StrR) rph spoT1
运输条件
干冰
存储
-80°C(化学感受态细胞的转化效率随存储时间增加逐渐降低,推荐收到货后3个月内尽快使用以获得最佳的转化效果)
使用说明书
VB UltraStableTM chemically competent cells
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