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该系统技术简单，利用质粒转染（非病毒转导）将目的基因永久整合到宿主基因组中。
该系统来源于Tol2转座子，它最初是从硬骨鱼青鳉鱼（Oryzias latipes）中分离出来的。
基于序列同源性分析，发现Tol2转座子与整个脊椎动物基因组中发现的非自主元件的hAT家族密切相关。
Tol2系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个反向末端重复序列（ITRs）以及两者之间的转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
Tol2系统包含两个组分，一个组分是Tol2转座酶（通常为表达Tol2转座酶的IVT
mRNA）。另一个组分为转座子载体，包含两个反向末端重复序列（ITR）以及两者之间的转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
表达Tol2转座酶的IVT mRNA和转座子载体共转染至靶细胞时，IVT
mRNA产生的转座酶将会识别转座子的两个ITR，然后将被转座区和两个ITR元件插入到宿主基因组中。Tol2转座子在宿主细胞中的插入位点没有明显碱基偏好性，这不同于具有特定靶标位点的转座子系统。...
#### 概述
在生物医学领域，利用常规转染将质粒载体转到哺乳动物细胞中是使用最广泛的方法。虽然近年来开发了不少更为先进的基因导入载体系统（如慢病毒载体、腺病毒载体、AAV载体和PB转座子载体等），但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用，这主要得益于其在技术上的简便性以及在各种类型细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性，并且在宿主基因组中的整合效率非常低（通常小于1%）。
关于常规质粒基因表达载体的更多信息，请参考以下文献。
参考文献 | 主题
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Mol Biotechnol. 16:151 (2000) | Overview of vector design for mammalian gene expression
EMBO J. 12:2539 (1993) | Transcription blocker prevent transcriptional interference
#### 亮点
我们的载体系统已经过优化，其在大肠杆菌中具有高拷贝复制能力，且对细胞具有高效转染率。...
## 概述
将常规质粒载体导入植物细胞原生质体是一种广泛的使用方法，可通过化学转化或电转完成。虽然已经开发了其他基因表达载体系统（如双元载体），但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用，这主要得益于其在技术上的简便性以及在植物细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性，并且在宿主基因组中的整合效率非常低（通常小于1%）。
关于该载体系统的更多信息，请参考以下文献。
参考文献 | 主题
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Biolistic and other non-Agrobacterium technologies of plant transformation, In Plant Biotechnology and Agriculture. Academic Press, San Diego, 2012, Pages 117-129 | Overview of plant transgenic methods using regular plasmid vectors....
## 概述
我们的PB转座子shRNA干扰载体系统是一种可稳定干扰多种细胞类型靶基因表达的简单而有效的方法。这种基于转座子的系统利用质粒转染（非病毒转导）将shRNA表达盒永久地整合到宿主细胞基因组中，由人类U6启动子驱动表达的shRNA将会导致靶基因mRNA的降解。与合成siRNA相比，PB转座子shRNA干扰具有明显的优势（见下文载体优势）。
PB转座子shRNA干扰载体系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个末端重复序列（TRs）以及两者之间的被转座区域，shRNA表达盒就克隆在这个区域。
当辅助质粒和转座子质粒共转染靶细胞时，辅助质粒产生的转座酶将会识别转座子的两个TR元件，然后将被转座区和两个TR元件插入到宿主基因组中。转座插入通常发生在包含TTAA序列的宿主染色体位点，并在转座子两侧出现TTAA重复序列。PB转座子属于II类转座子，通过"剪切
--粘贴"的机制移动，从一个地方转座到另一个地方，而不留下序列本身（恰好相反，I类转座子是通过"复制--
粘贴"的方式移动）。...
FLEX Cre-switch系统利用位于两个平行反向ORF两侧的Lox-
变体重组位点，在Cre重组酶的调控下失活一个目的基因的表达，而激活另一个目的基因表达。
FLEX Cre-switch系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于两个基因ORF的两侧。
两个ORF相互反向，其中一个ORF具有正确的读码方向（相对于启动子）。两种Lox-变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-
变体不能进行重组。LoxP和Lox2272位点以交替方式位于两个ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况时，第一个ORF由于其编码方向与启动子方向相同，可以在客户定制的启动子驱动下正常表达，而第二个ORF由于其方向相反则无法正常表达。在Cre的存在下，LoxP和Lox2272位点对分别重组，导致两个ORF方向反转，且其中的一对重组位点将具有相同的方向，Cre会介导产生正向重组切割，继而分别留下一个不同的重组位点。
ORF方向的反转，使得第二个OR可以在启动子的驱动下正常表达，而第一个ORF将不表达。...
## 概述
在生物医学领域，利用常规转染将质粒载体转到哺乳动物细胞中是使用最广泛的方法。虽然近年来开发了不少更为先进的基因导入载体系统（如慢病毒载体、腺病毒载体、AAV载体和PB转座子载体等），但常规质粒基因表达载体仍被大多数实验室使用，这主要得益于其在技术上的简便性以及在各种类型细胞中的高效转染率。常规质粒载体转染的关键特点是短暂性，并且在宿主基因组中的整合效率非常低（通常小于1%）。
关于常规质粒基因表达载体的更多信息，请参考以下文献。
参考文献 | 主题
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Mol Biotechnol. 16:151 (2000) | Overview of vector design for mammalian gene expression
EMBO J. 12:2539 (1993) | Transcription blocker prevent transcriptional interference
## 亮点
我们的载体系统已经过优化，其在大肠杆菌中具有高拷贝复制能力，且对细胞具有高效转染率。...
## 概述
PB转座子载体系统可以非常高效地把外源DNA插入哺乳动物细胞的基因组，该系统技术简单，可利用质粒转染（非病毒转导）把您所感兴趣的基因长期稳定地整合到靶细胞基因组。
该系统来源于PB转座子，最开始在粉纹夜蛾（Trichoplusia ni） 中发现并分离而来。基于序列同源性分析，PB转座子是许多常见物种共有的一类转座子。
PB转座子系统包含两个组分，一个组分为PBase转座酶（通常为表达PBase的IVT
mRNA）；另一个组分被称为转座子质粒，包含两个末端重复序列（TR）以及两者之间的被转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
当表达PBase的IVT mRNA和转座子质粒共转染靶细胞时，PBase IVT
mRNA产生的转座酶将会识别转座子的两个TR元件，然后将被转座区和两个TR元件插入到宿主基因组中。转座插入通常发生在包含TTAA序列的宿主染色体位点，并在转座子两侧出现TTAA重复序列。...
通常情况下，将感兴趣的增强子克隆到该载体小鼠最小启动子Hsp68的上游，并将构建好的载体用于制备转基因小鼠。对转基因胚胎或成年小鼠中LacZ报告基因的表达情况进行检测，可以进一步分析增强子的活性。
PB转座子载体系统可以非常高效地把外源DNA插入哺乳动物细胞的基因组，该系统技术简单，可利用质粒转染（非病毒转导）把您所感兴趣的基因长期稳定地整合到靶细胞基因组。
PB转座系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个末端重复序列（TR）以及两者之间的被转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。当辅助质粒和转座子质粒共转染靶细胞时，辅助质粒产生的转座酶将会识别转座子的两个TR元件，然后将被转座区和两个TR元件插入到宿主基因组中。转座插入通常发生在包含TTAA序列的宿主染色体位点，并在转座子两侧出现TTAA重复序列。
PB转座子属于II类转座子，通过"剪切--粘贴"的机制移动，从一个地方转座到另一个地方，而不留下序列本身（恰好相反，I类转座子是通过"复制--
粘贴"的方式移动）。...
Cre重组酶不存在的情况时，目的基因由于其编码方向与启动子方向相反，所以不发生表达；
在Cre的存在下，LoxP和Lox2272位点对分别重组，导致ORF方向反转为正向，且其中的一对重组位点将具有相同的方向，Cre会介导产生正向重组切割，继而分别留下一个不同的重组位点。
ORF的方向反转，使得目的基因可以在启动子的驱动下正常表达。 由于ORF侧翼是两个不同的Lox-变体位点，所以即使存在Cre也不会进一步发生重组。
虽然该载体系统可用于组织培养细胞，但它更适用于制备转基因动物。
当携带这种载体的转基因动物与携带组织特异性Cre的转基因动物杂交时，在携带两种载体的后代转基因动物中，特别是在表达组织特异性Cre的细胞中，目的基因将会在客户定制的启动子驱动下正常表达。
抗性筛选或荧光基因可以添加到该载体中，以便于通过药筛或者荧光筛选出永久整合外源基因的细胞。
关于该载体系统的更多信息，请参考以下文献。...
Cre重组酶存在的情况下，LoxP和Lox2272位点对分别重组，导致ORF方向反转为反向，且其中的一对重组位点将具有相同的方向，Cre会介导产生正向重组切割，继而分别留下一个不同的重组位点。ORF方向的反转，使得目的基因无法正常表达。由于ORF侧翼是两个不同的Lox-
变体位点，所以即使存在Cre也不会进一步发生重组。
虽然该载体系统可用于组织培养细胞，但它更适用于制备转基因动物。
当携带这种载体的转基因动物与携带组织特异性Cre的转基因动物杂交时，在携带两种载体的后代转基因动物中，特别是在表达组织特异性Cre的细胞中，目的基因的表达将会失活。
抗性筛选或荧光基因可以添加到该载体中，以便于通过药筛或者荧光筛选出永久整合外源基因的细胞。
关于该载体系统的更多信息，请参考以下文献。...
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