搜索“微载体细胞培养榜篯端游捏脸吗 sitezhidaobaiducom”得到76个结果，以下为结果51-60
## 概述
FLEX条件性表达腺病毒载体结合了载体家的高效的腺病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，可以帮助您实现在多种多样的哺乳动物细胞中以腺病毒转导Cre响应的FLEX基因表达调控开关。FLEX
Cre-Off系统利用位于目的基因两侧的Lox-变体重组位点，在Cre重组酶的调控下目的基因发生反转，目的基因表达被抑制。
FLEX Cre-off系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于ORF的两侧。 两种Lox-
变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-变体不能进行重组。
LoxP和Lox2272位点以交替方式位于ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况下，客户定制的启动子可以驱动目的基因的正常表达。Cre重组酶存在的情况下，LoxP和Lox2272位点对分别重组，导致ORF方向反转为反向，且其中的一对重组位点将具有相同的方向，Cre会介导产生正向重组切割，继而分别留下一个不同的重组位点。ORF方向的反转，使得目的基因无法正常表达。...
在自然界中，细菌利用CRISPR/Cas抵抗质粒和噬菌体等外源遗传物质的入侵，从而保持自身基因组的完整性。
两个生物大分子，Cas9蛋白和gRNA（guide
RNA）组成了CRISPR/Cas9基因编辑系统。在细胞内，Cas9蛋白与gRNA形成复合物，能特异性鉴别出靶序列。此过程中，Cas9蛋白负责将复合物定点到靶DNA和剪切靶DNA。Cas9蛋白有6个结构域，分别是Rec
I、Rec II、Bridge Helix、PAM Interacting、HNH和RuvC。Rec
I是6个中最大的一个结构域，负责结合gRNA。一旦结合了靶DNA，Bridge Helix就负责启动剪切。PAM
interacting结构域赋予Cas9对PAM序列的特异性要求，负责启动与靶DNA的结合。HNH和RuvC都是核酸酶结构域，剪切单链DNA。
图1. Cas9蛋白结构域
在没有结合gRNA的情况下，Cas9蛋白保持失活状态。gRNA是一条单链RNA，会形成一个T型结构。在这个T结构里，有几个显著的特征：tetraloop、3个stem
loop和5' 端与靶DNA互补的序列。...
## 概述
我们的pUASTattB载体系统是一个高效的转基因果蝇制备和基因表达控制系统。该系统利用噬菌体φC31整合酶介导的重组实现靶向基因有效插入，并结合强大的诱导型启动子Gal4调节转基因表达。pUASTattB载体系统类似于pUAST系统，然而它是利用φC31整合酶介导重组而不是基于P元件的转座实现目的基因的插入。
噬菌体φC31整合酶能高效介导噬菌体附着位点（称为attP）和细菌附着位点（称为attB）之间的序列特异性重组。与基于转座子系统（如P元件介导的重组）相反，φC31介导的插入是不可逆的。pUASTattB整合到attP位点后会产生两个新的位点（attL和attR），新的位点将不再被φC31整合酶识别。另外，基于φC31的插入是具有位点特异性的，通常仅在attP位点发生。基于这个原因，pUASTattB载体系统通常用于携带attP"着陆位点"的果蝇系。
pUASTattB系统包含两个载体，一个称为pUASTattB载体或是携带attB位点和目的基因的φC31供体载体；另一个为编码φC31整合酶的辅助载体。...
## 概述
LEX条件性表达慢病毒载体结合了载体家的高效的第三代慢病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，可以帮助您实现在多种多样的哺乳动物细胞中以慢病毒转导Cre响应的FLEX基因表达调控开关。FLEX
Cre-Switch系统的两个Lox-
变体重组位点之间包含一对反向平行的ORF，在Cre重组酶的调控下ORF上的两个目的基因编码方向反转，从而让一个目的基因从激活表达变成沉默，另一个目的基因从沉默变成激活表达。
FLEX Cre-switch系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于两个基因ORF的两侧。
两个ORF相互反向，其中一个ORF具有正确的读码方向（相对于启动子）。两种Lox-变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-
变体不能进行重组。LoxP和Lox2272位点以交替方式位于两个ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况时，第一个ORF由于其编码方向与启动子方向相同，可以在客户定制的启动子驱动下正常表达，而第二个ORF由于其方向相反则无法正常表达。...
## 概述
腺病毒载体能高效转导大多数的哺乳动物细胞，并以游离的DNA形式存在于宿主细胞中。该载体系统是把外源基因导入体内的优先使用方法，经常用于基因治疗和疫苗。
腺病毒载体来源于诱发普通感冒的腺病毒，野生型腺病毒基因组是线性双链DNA。
腺病毒重组载体构建完成后转染进入包装细胞。在包装过程中，位于两个反向重复序列（ITRs）之间的DNA片段与由包装细胞表达的病毒蛋白进一步包装成病毒颗粒。
当病毒转导宿主细胞时，两个ITR之间的外源DNA及病毒基因组一起进入细胞，并以游离DNA的形式存在于细胞核中。
通过改造优化，我们的腺病毒载体缺失了E1A、E1B和E3区，前两者与病毒包装相关（这两个基因已被整合到包装细胞的基因组中）。因此，运用我们的病毒载体包装出来的病毒是复制缺陷型的（只能转导靶细胞而不能自我复制），大大提高了生物安全性。
关于腺病毒基因表达载体的更多信息，请参考以下文献。...
## 概述
我们的Tol2载体系统能高效地将外源DNA插入宿主细胞基因组中。该系统技术简单，利用质粒转染（非病毒转导）将目的基因永久整合到宿主基因组中。
该系统来源于Tol2转座子，它最初是从硬骨鱼青鳉鱼（Oryzias latipes）中分离出来的。
基于序列同源性分析，发现Tol2转座子与整个脊椎动物基因组中发现的非自主元件的hAT家族密切相关。
Tol2系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个反向末端重复序列（ITRs）以及两者之间的转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
Tol2系统包含两个组分，一个组分是Tol2转座酶（通常为表达Tol2转座酶的IVT
mRNA）。另一个组分为转座子载体，包含两个反向末端重复序列（ITR）以及两者之间的转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
表达Tol2转座酶的IVT mRNA和转座子载体共转染至靶细胞时，IVT
mRNA产生的转座酶将会识别转座子的两个ITR，然后将被转座区和两个ITR元件插入到宿主基因组中。...
## 概述
我们的Tol2载体系统可以非常有效地将外源DNA插入到宿主细胞的基因组中。该系统技术简单，利用质粒转染或电转的方法可将您感兴趣的基因永久整合到宿主基因组中。
该系统来源于Tol2转座子，它最初是从硬骨鱼青鳉鱼（Oryzias latipes）中分离出来的。
基于序列同源性分析，发现Tol2转座子与整个脊椎动物基因组中发现的非自主元件的hAT家族密切相关。
Tol2系统包含两个载体，一个载体被称为辅助质粒，负责编码转座酶；另一个载体被称为转座子质粒，包含两个反向末端重复序列（ITRs）以及两者之间的转座区域，需要被转座到宿主基因组中的目的基因就克隆在这个区域。
当辅助质粒和转座子质粒共转染靶细胞时，辅助质粒产生的转座酶将会识别转座子的两个ITR，然后将被转座区和两个ITR元件插入到宿主基因组中。Tol2转座子在宿主细胞中的插入位点没有明显碱基偏好性，这不同于具有特定靶标位点的转座子系统。如，PB转座插入通常发生在包含TTAA序列的宿主染色体位点。...
## 概述
FLEX条件性表达腺病毒载体结合了载体家的高效的腺病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，可以帮助您实现在多种多样的哺乳动物细胞中以腺病毒转导Cre响应的FLEX基因表达调控开关。FLEX
Cre-Switch系统的两个Lox-
变体重组位点之间包含一对反向平行的ORF，在Cre重组酶的调控下ORF上的两个目的基因编码方向反转，从而让一个目的基因从激活表达变成沉默，另一个目的基因从沉默变成激活表达。
FLEX Cre-switch系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于两个基因ORF的两侧。
两个ORF相互反向，其中一个ORF具有正确的读码方向（相对于启动子）。两种Lox-变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-
变体不能进行重组。LoxP和Lox2272位点以交替方式位于两个ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况时，第一个ORF由于其编码方向与启动子方向相同，可以在客户定制的启动子驱动下正常表达，而第二个ORF由于其方向相反则无法正常表达。...
## 概述
CRISPR/Cas9（规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白9）核酸酶表达载体属于几种新兴的基因组编辑工具之一（另外两种是ZFN和TALEN），可在基因组的靶位点快速有效地产生突变。这些质粒载体编码的特异性RNA，能够引导DNA核酸酶（或缺刻酶）编辑基因组中特定位点的DNA序列。
Cas9是RNA引导DNA核酸酶，是天然原核免疫系统的一部分，赋予细菌产生对质粒和噬菌体等外源遗传物质的抵抗能力。在细胞内，Cas9核酸酶与引导RNA（gRNA）形成复合物，该复合物通过与基因组中的18-22nt的同源靶序列直接相互作用，gRNA与靶位点通过互补配对使Cas9定位到靶序列上，然后切割基因组中的靶位点。
使用CRISPR打靶目的基因需要目标细胞同时表达Cas9和特异gRNA。这可以通过在同一个载体上共表达Cas9和gRNA，也可以通过在两个载体各上自表达Cas9和gRNA来实现。使用Cas9和gRNA两个载体分开表达的优势在于可使用不同的gRNA与不同的Cas9变体组合（如野生型Cas9，Cas9n，dCas9），从而根据实验目的带来更多变的实验方案。...
## 概述
MMLV逆转录病毒基因表达载体系统是一种非常高效的，能把外源基因稳定整合到哺乳动物细胞基因组的系统，也是在iPS细胞制备中特别受欢迎的基因转导方法。
MMLV逆转录病毒载体来源于莫洛尼（氏）鼠白血病病毒，属于逆转录病毒家族，野生型逆转录病毒基因组是线性双正链RNA。
MMLV逆转录病毒重组载体构建完成后与辅助质粒一起转染进入包装细胞。在包装细胞中，位于两个长末端重复序列（LTRs）之间的DNA片段会被转录成RNA，由辅助质粒表达的病毒蛋白将其包装形成病毒颗粒。包装后的活体病毒将会被释放到上清液中，可以直接收集或进一步浓缩病毒转染靶细胞。
当病毒转导靶细胞时，释放到宿主细胞中的病毒RNA借助逆转录酶逆转录成DNA，然后随机整合进宿主细胞的基因组中。在病毒载体中，位于两个LTR的DNA片段和病毒基因组都会稳定整合到靶细胞的基因组中。
通过改造优化，我们的MMLV逆转录病毒载体删除了与病毒包装和转导相关的基因（这些基因由辅助质粒进行表达，用于病毒包装过程）。因此，通过逆转录病毒载体包装产生的病毒是复制缺陷型的（只能转导靶细胞而不能自我复制），具有非常高的生物安全性。...
服务商工作站 >>
