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Probe-RNA体外转录载体（用于原位杂交）

长RNA体外转录载体可用于产生RNA探针（即核糖核酸探针），用于原位杂交。该系统结合了T7和SP6启动子，您的目的序列将被克隆在这两个启动子之间。在适当的反应条件和三磷酸核苷酸的存在下，T7噬菌体RNA聚合酶（T7 RNAP）或SP6 RNAP可以促进高效合成核糖核酸探针。这两个启动子方向相反，一个启动子将产生有义转录物，另一个将产生反义转录物。根据插入片段的方向和实验目的，用户可以选择使用T7 RNAP、SP6 RNAP或两者一起进行体外转录。T7和SP6启动子侧翼序列也可用作PCR扩增或测序的引物结合位点。通过利用半抗原标记的或荧光基团标记的或是放射性标记的核苷酸进行转录，以便于原位杂交探针定位检测。我们建议您参考已发表文献中经测试的体外转录和原位杂交步骤说明来进行实验。 T7和SP6 RNAP对于有效的转录起始均具有碱基要求，且这些碱基已经被放置到载体上。T7启动子3'末端的前两个碱基是GG，紧接着是客户的目的序列；SP6启动子3'末端的前三个碱基是GAA，紧接着是客户的目的序列。...

哺乳动物shRNA干扰scAAV载体

ssAAV病毒颗粒感染细胞后，必须借助宿主细胞的DNA聚合酶复制出第二条链（second strand synthesis）后才能成为有转录功能的dsDNA（double-stranded DNA，双链DNA）。除了第二条链合成途径，多个ssAAV进到细胞后，部分正链基因组分子和负链基因组分子（plus- and minus-stranded AAV genomes）也能退火形成dsDNA。当AAV载体上的基因组长度小于野生型AAV基因组长度的一半，包装出的病毒颗粒也会出现含有二聚体形式的基因组（dimeric genome），而不是单聚体基因组（monomeric genome）。这些病毒转导细胞后，二聚体形式的基因组自行退火形成dsDNA，从而绕过了第二条链合成的这一步限速步骤。为了进一步增加病毒二聚体基因组的量，我们将AAV载体的3' ITR（Inverted terminal repeat）中的trs序列（terminal resolution site）删除。...

RCAS基因表达载体

#### 概述 RCAS（Replication-Competent Avian Sarcoma-Leukosis Virus Long Terminal Repeat with a Splice Acceptor）是一种源自具有复制能力的Rous肉瘤病毒（Rous Sarcoma Virus, RSV）的逆转录病毒载体。该载体具备剪切受体以及禽肉瘤- 白血病病毒（ASLV）的长末端重复序列（LTR）。野生型RSV保留了所有必要的病毒基因以及原癌基因src。在RCAS载体里，src原癌基因被移除，并由目的基因替代，但仍保留了src的剪接位点，由此插入的目的基因能够在LTR的驱动下，通过剪接形成病毒转录本进而实现表达。RCAS载体在合适的禽类细胞中依旧具备复制能力，并且能够感染表达禽类病毒受体的哺乳动物细胞。 RCAS表达载体RCASBP(A)，是基于Bryan Polymerase（BP）株的RSV病毒基因组序列构建而成。该毒株属于A亚群，拥有能与TVA受体特异性结合的包膜蛋白。与普通RCAS相比，RCASBP株在鸡细胞中有更高的复制效率。...

哺乳动物CAR表达质粒载体

## 概述利用嵌合抗原受体 (Chimeric antigen receptor，CAR) 载体生产可识别肿瘤相关抗原的工程T细胞（也称为CAR- T细胞）已成为一种极富前景的癌症治疗工具。在 CAR- T细胞免疫疗法中，来自患者（自体）或健康供体（同种异体）的T细胞经过改造表达CAR。CAR受体可以靶向识别肿瘤细胞表面抗原，活化T细胞使其发挥免疫作用以帮助杀伤肿瘤细胞。 CAR受体的结构由四个主要部分组成：（1）一个胞外抗原识别结构域，由已知特异性的抗体的单链可变区片段 (Single chain variable fragment，scFv) 组成。 scFv促进抗原结合，包含一个轻链可变区片段和一个特异的单克隆抗体的重链片段，两者通过一个柔性的肽链相连；（2）一个位于胞外的铰链区或间隔区，将scFv与CAR的跨膜结构域连接起来，并为CAR的结构提供灵活性和稳定性；（3）跨膜结构域，将CAR锚定在质膜上，从而将胞外的铰链区和抗原结合结构域同细胞内结构域关联起来。...

哺乳动物Cas9表达腺病毒载体

## 概述 CRISPR/Cas9（规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白9）核酸酶表达载体属于几种新兴的基因组编辑工具之一（另外两种是ZFN和TALEN），可在基因组的靶位点快速有效地产生突变。这些质粒载体编码的特异性RNA，能够引导DNA核酸酶（或缺刻酶）编辑基因组中特定位点的DNA序列。 Cas9是RNA引导DNA核酸酶，是天然原核免疫系统的一部分，赋予细菌产生对质粒和噬菌体等外源遗传物质的抵抗能力。在细胞内，Cas9核酸酶与引导RNA（gRNA）形成复合物，该复合物通过与基因组中的18-22nt的同源靶序列直接相互作用，gRNA与靶位点通过互补配对使Cas9定位到靶序列上，然后切割基因组中的靶位点。使用CRISPR打靶目的基因需要目标细胞同时表达Cas9和特异gRNA。这可以通过在同一个载体上共表达Cas9和gRNA，也可以通过在两个载体各上自表达Cas9和gRNA来实现。使用Cas9和gRNA两个载体分开表达的优势在于可使用不同的gRNA与不同的Cas9变体组合（如野生型Cas9，Cas9n，dCas9），从而根据实验目的带来更多变的实验方案。...

哺乳动物Cas9表达PB转座子载体

## 概述 CRISPR/Cas9（规律成簇的间隔短回文重复序列及相关蛋白9）核酸酶表达载体属于几种新兴的基因组编辑工具之一（另外两种是ZFN和TALEN），可在基因组的靶位点快速有效地产生突变。这些质粒载体编码的特异性RNA，能够引导DNA核酸酶（或缺刻酶）编辑基因组中特定位点的DNA序列。 Cas9是RNA引导DNA核酸酶，是天然原核免疫系统的一部分，赋予细菌产生对质粒和噬菌体等外源遗传物质的抵抗能力。在细胞内，Cas9核酸酶与引导RNA（gRNA）形成复合物，该复合物通过与基因组中的18-22nt的同源靶序列直接相互作用，gRNA与靶位点通过互补配对使Cas9定位到靶序列上，然后切割基因组中的靶位点。使用CRISPR打靶目的基因需要目标细胞同时表达Cas9和特异gRNA。这可以通过在同一个载体上共表达Cas9和gRNA，也可以通过在两个载体各上自表达Cas9和gRNA来实现。使用Cas9和gRNA两个载体分开表达的优势在于可使用不同的gRNA与不同的Cas9变体组合（如野生型Cas9，Cas9n，dCas9），从而根据实验目的带来更多变的实验方案。...

哺乳动物基因FLEX条件性表达慢病毒载体（Cre-Switch）

## 概述 LEX条件性表达慢病毒载体结合了载体家的高效的第三代慢病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，可以帮助您实现在多种多样的哺乳动物细胞中以慢病毒转导Cre响应的FLEX基因表达调控开关。FLEX Cre-Switch系统的两个Lox- 变体重组位点之间包含一对反向平行的ORF，在Cre重组酶的调控下ORF上的两个目的基因编码方向反转，从而让一个目的基因从激活表达变成沉默，另一个目的基因从沉默变成激活表达。 FLEX Cre-switch系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于两个基因ORF的两侧。两个ORF相互反向，其中一个ORF具有正确的读码方向（相对于启动子）。两种Lox-变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox- 变体不能进行重组。LoxP和Lox2272位点以交替方式位于两个ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况时，第一个ORF由于其编码方向与启动子方向相同，可以在客户定制的启动子驱动下正常表达，而第二个ORF由于其方向相反则无法正常表达。...

哺乳动物CAR表达慢病毒载体

## 概述利用嵌合抗原受体 (Chimeric antigen receptor，CAR) 载体生产可识别肿瘤相关抗原的工程T细胞（也称为CAR T细胞）已成为一种极富前景的癌症治疗工具。在 CAR T细胞免疫疗法中，来自患者（自体）或健康供体（同种异体）的T细胞经过改造表达CAR。CAR受体可以靶向识别肿瘤细胞表面抗原，活化T细胞使其发挥免疫作用以帮助杀伤肿瘤细胞。 CAR受体的结构由四个主要部分组成：（1）一个胞外抗原识别结构域，由已知特异性的抗体的单链可变区片段 (Single chain variable fragment，scFv) 组成。 scFv促进抗原结合，包含一个轻链可变区片段和一个特异的单克隆抗体的重链片段，两者通过一个柔性的肽链相连；（2）一个位于胞外的铰链区或间隔区，将scFv与CAR的跨膜结构域连接起来，并为CAR的结构提供灵活性和稳定性；（3）跨膜结构域，将 CAR 锚定在质膜上，从而将胞外的铰链区和抗原结合结构域同细胞内结构域关联起来。...

哺乳动物基因FLEX条件性表达慢病毒载体（Cre-Off）

. ## 概述 FLEX条件性表达慢病毒载体结合了载体家的高效的第三代慢病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，帮助您实现在病毒宿主基因组上永久整合Cre重组酶响应的FLEX Cre-Off基因调控开关。FLEX Cre-Off系统利用位于目的基因两侧的Lox- 变体重组位点，在Cre重组酶的调控下目的基因发生反转，目的基因正常表达；而Cre不存在的情况下，目的基因不表达。 FLEX Cre-Off系统由两对异型Lox-变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于ORF的两侧。两种Lox- 变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-变体不能进行重组。 LoxP和Lox2272位点以交替方式位于ORF两端，每对位点互为反向。Cre重组酶不存在的情况下，客户定制的启动子可以驱动目的基因的正常表达。Cre重组酶存在的情况下，LoxP和Lox2272位点对分别重组，导致ORF方向反转为反向，且其中的一对重组位点将具有相同的方向，Cre会介导产生正向重组切割，继而分别留下一个不同的重组位点。...

哺乳动物基因FLEX条件性表达慢病毒载体（Cre-On）

## 概述 FLEX条件性表达慢病毒载体结合了载体家的高效的第三代慢病毒载体系统和Cre响应的FLEX条件性基因表达载体，帮助您实现在病毒宿主基因组上永久整合Cre重组酶响应的FLEX Cre-On基因调控开关。FLEX Cre-On系统利用位于目的基因两侧的Lox- 变体重组位点，在Cre重组酶的调控下目的基因发生反转，目的基因正常表达；而Cre不存在的情况下，目的基因不表达。 FLEX Cre-On系统由两对异型Lox- 变体重组位点组成，其中野生型序列称为LoxP，突变体称为Lox2272，分别位于反向基因ORF（相对启动子方向而言）的两侧。两种Lox- 变体都可被Cre识别，但只有相同的Lox位点对可以彼此重组，与其他Lox-变体不能进行重组。 LoxP和Lox2272位点以交替方式位于ORF两端，每对位点互为反向。...