云舟生物可提供经过N1-甲基假尿苷(m1Ψ)修饰的或无修饰的HiExpressTM萤火虫荧光素酶 IVT mRNA。这些IVT mRNA产品均经过序列优化和全面的效果验证,无论在体外还是体内都表现出很高的表达水平。
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HiExpress™萤火虫荧光素酶IVT mRNA
HiExpress™高斯荧光素酶IVT mRNA
高斯荧光素酶是一种仅包含185个氨基酸的单体酶。该酶在低表达的情况下仍然可以被灵敏地检测到荧光信号。高斯荧光素酶是分泌型的报告基因蛋白,可在不裂解细胞的情况下测量其反应活性,并允许细胞用于下游应用或者其它需要实时检测或随时间推进检测的实验。此外,高斯荧光素酶由于含有多个二硫键而高度稳定,使其相当适用于高温或者存在特殊化学物质环境中的应用。
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试验验证
- HiExpress™萤火虫荧光素酶IVT mRNA
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图1 HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA的体外与体内表达效果。(A)HEK293T细胞中表达HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA以及其它版本的荧光素酶mRNA。细胞生长于12孔板,每孔转染0.5 ug mRNA。转染后6 h、24 h、48 h以及72 h测定荧光素酶活性。(B)向C57BL/6成年小鼠肌肉注射30 ug LNP包封的荧光素酶mRNA,注射后6 h、24 h、48 h测定荧光素酶活性。Fluc WT表示野生型荧光素酶mRNA。Fluc WT (co)表示经过密码子优化的荧光素酶mRNA。Fluc2表示luc2荧光素酶mRNA。HiExpressTM Fluc表示云舟生物HiExpressTM萤火虫荧光素酶IVT mRNA。

图2 HiExpressTM高斯荧光素酶IVT mRNA在HEK293T细胞中的表达效果。HEK293T细胞以2.3x105个细胞/孔接种12孔板。每孔转染1 ug mRNA。转染后分别在6 h、24 h、48 h、72 h和96 h取20 ul细胞检测高斯荧光素酶活性。RLU,相对光单位;Control,添加了转染试剂但是没有添加mRNA。