IRES-EGFP circRNA

云舟生物的IRES-EGFP IVT circRNA通过内含子剪切在细胞内形成共价闭环RNA分子，可提供强大的GFP表达效果。对比传统mRNA，circRNA的降解动力学发生了改变，延长了GFP的表达时效。该circRNA通过了体外表达测试。

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试验验证

未修饰
m6A修饰

图1 编码EGFP的环状RNA被转染至HEK293T细胞中，并通过荧光显微镜进行分析。与传统mRNA相比，转染环状RNA的细胞表现出更持久的表达。

Gel electrophoresis analysis of precursor and circular EGFP RNA (circRNA-EGFP) after incubation with varying concentrations of RNase A as indicated above. RNAse A will digest all linear but not circular RNA

图2 不同浓度的核糖核酸酶A作用下孵育后，对前体和环状EGFP RNA（circRNA-EGFP）进行凝胶电泳分析。核糖核酸酶A将消化所有线性RNA，但不会消化环状RNA。

图3 m6A 修饰可增强环状 RNA（circRNA）的表达。（A）未添加或部分添加 N6 - 甲基腺苷（m6A）的EGFP环状RNA可高效合成，而完全 m6A 修饰则会破坏其环化过程。由于环状RNA缺乏游离末端，因此在电泳过程中迁移速度慢于线性RNA。（B）在 12 孔板中将 1μg RNA 转染至 293T 细胞后，含 5% m6A 的环状 RNA 表现出最高的 EGFP 表达水平。曝光时间：明场，200 毫秒；EGFP，100 毫秒。