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hSpCas9 IVT mRNA

我们可制备无核苷修饰或N1-甲基假尿苷(m1Ψ)修饰的hSpCas9 mRNA。我们的hSpCas9 IVT mRNA经过试验验证,在体外细胞中可以高水平表达hSpCas9。

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试验验证

hSpCa9 IVT mRNA在体外的基因编辑效果

图1(A)向表达EGFP的HEK293T细胞转染打靶RGFP的gRNA以及经过N1-甲基假尿苷(m1Ψ)修饰的hSpCas9 IVT mRNA。(B)通过显微镜(100X)观察无转染的(NC)以及转染的两组细胞。(C)流式细胞术定量检测荧光强度。(D)转染后48或72 h,转染后的细胞相对NC减少了约40%的EGFP表达量。(E和F)基因编辑效果通过T7E1酶切(E)和Sanger测序确认(F)。高亮表示的腺嘌呤表明了在靶序列的插入突变。

载体设计