工艺开发

载体优化

作为载体克隆及病毒包装服务的全球领先供应商，我们的团队已在载体学及病毒学方面累积了广泛且丰富的背景知识，由此我们有能力为其在基础研究及基因治疗应用方向上提供载体设计优化的服务。我们已经为客户设计并交付了众多不同的载体，已验证有效可用，安全可接受。我们每年为全球客户设计及交付超30,000个的定制载体以及超10,000个以上的病毒，可进行体外测试或体内验证。另外，我们在BAC和YAC的重组构建上也掌握了专业技术，由此我们也可以进行非病毒载体的大型病毒基因组构建开发。利用高度复杂的文库构建技术以及NGS测试筛选，我们可以为载体设计优化提供大规模的筛选平台。我们的优势：

• 丰富多样的已验证载体元件

  载体骨架、启动子（广泛性、组织特异性、诱导性、人工合成）、ORF、连接子、蛋白标签以及shRNA和CRISPR靶点库等

• 大规模筛选平台

  组织特异性启动子/增强子筛选、衣壳蛋白进化、shRNA筛选、CRISPR筛选、Rep/Cap启动子优化、CAR抗体筛选等

• 病毒基因组构建

  新型病毒载体的体外构建。利用BAC和YAC重组技术构建如冠状病毒和单纯性疱疹病毒（HSV）等大型基因组病毒

上游工艺开发

我们在质粒DNA和病毒载体上游工艺开发的项目包括：

• 细胞系开发

  细菌、哺乳类细胞系、昆虫细胞系

• 细菌发酵培养规模化和扩展化

  发酵系统目前最大可支持100 L体积的搅拌培养

• 哺乳类细胞系和昆虫细胞系培养规模化或扩展化
  • 贴壁培养系统：培养瓶、10层细胞工厂、固定床生物反应器（iCELLis Nano & 500, Univercells Technologies scale-X & NevoLine Upstream）等
  • 悬浮培养系统：摇瓶、波浪式生物反应器（最高50 L）、一次性生物反应器（最高200 L）
• 培养基筛选及优化

  无抗生素、无血清、无动物源、化学合成等培养基

• 高密度细胞培养体系优化

  细菌、哺乳类细胞系、昆虫细胞系

• 转染/感染体系优化

  Rep/Cap和辅助质粒优化、质粒DNA比例、转染试剂、感染MOI、细胞密度等

下游工艺开发

载体下游工艺开发的项目包括：

• 收获和裂解工艺优化

  收获时间、细胞裂解方法、核酸酶处理方法等

• 纯化工艺优化
  • 柱层析工艺：分子筛、离子交换柱、亲和柱以及混合柱处理方式等
  • 梯度离心工艺：蔗糖、氯化铯以及碘克沙醇
• 澄清，浓缩和缓冲液置换

  UF/DF（超滤/渗滤）方式（切向流、中空纤维柱、深层过滤）