昆虫杆状病毒包装

杆状病毒(Baculovirus)被广泛用于在昆虫细胞中生产大量重组蛋白,因其具有以下优点:(1)适当的翻译后修饰,因为昆虫细胞是高等真核生物;(2)病毒基因组比较大,约130 kb,因此具有多个基因或大插入片段的高容量;(3)生物安全性高,因为野生杆状病毒不会感染人类;(4)强启动子Polyhedrin或p10驱动的蛋白产量非常高。我们开发出一系列专有技术和试剂,从病毒滴度、纯度、活性以及一致性等方面显著提升了杆状病毒包装工艺水平。

订购信息
交付内容
杆状病毒病毒制备服务
交付内容

定制病毒,按照规格交付:

中量制备:>106TU/ml,10 x 100 ul

⼤量制备:>107TU/ml,10 x 100 ul

对照病毒,按照定制病毒的规格对应赠送:

中量制备:>106TU/ml,2 x 100 ul

⼤量制备:>106TU/ml,2 x 100 ul

Polybrene(5 mg/ml,200 ul),赠送
病毒重悬液 DPBS缓冲液
运输/存储 干冰/-80°C,避免反复冻融
推荐应用 昆虫细胞转导

对照病毒

为了更好地开展您的实验,我们按照“对照病毒与定制病毒的生物学应用相匹配”的原则给您赠送或者推荐对照病毒。例如,如果定制病毒表达一个基因,则推荐的对照病毒表达荧光蛋白EGFP。推荐的对照病毒信息如下表所示:

对照病毒 对照载体名称 对照载体ID 定制病毒
EGFP对照杆状病毒 pBV-EGFP VB170317-1029uux 哺乳动物基因表达杆状病毒
运输/储存

我们的杆状病毒存储在DPBS缓冲液中,并采用干冰运输。收到病毒后,立即放置于-80℃,长期贮存至少6个月。杆状病毒放置于-20℃可保存一周。请避免反复冻融,因为这会导致病毒滴度大幅下降。

生产/质控
步骤 描述 时间

Transformation into E. coli cells

将携带目的基因(Gene of Interest, 简称GOI)和Tn7转座位点的转移载体(Transfer vector)转化到特定大肠杆菌里,此菌株含有一个表达Tn7转座酶的辅助质粒(helper plasmid)和一个含有杆状病毒基因组序列的大质粒(即bacmid,约136 kb,在杆状病毒序列中有Tn7转座位点)。在该细菌里,转移载体上的目的基因转座到bacmid上,形成携带目的基因的重组bacmid。 第1天

Transfection into insect cells

重组bacmid经过检测且序列无误后,将重组bacmid质粒DNA转染昆虫Sf9细胞。此时包装出来的为粗制的杆状病毒。 第4天

Virus amplification

病毒扩增:使用粗制的杆状病毒再次感染包装细胞,从而扩大病毒产量。 第9天

Virus purification

从培养上清中收集病毒颗粒。对于大规格包装,采用蔗糖离心进一步浓缩。 第14天

Quality Control

我们采用基于qPCR的方法测定昆虫杆状病毒的滴度。

对于每一个我们生产的杆状病毒,质量控制均包括滴度测定(Titer determination)、微生物(细菌和真菌)检测(Bioburden test)、支原体检测(Mycoplasma test)。若转移载体同时编码一个荧光蛋白,我们还会将病毒进行细胞转导以测定相应的荧光表达情况(Transduction test)。

第15天及以后
交付周期

交付周期是指订单接收到发货之间的时间,不包括需要客户提供任何物料(如病毒载体)的等待时间。

客户提供载体

如需客户提供杆状病毒载体,则请按照外来物品接收指南将载体寄送给我们。请严格按照我们的指南来进行装运以免造成物品的任何延误和损坏。客户提供的所有材料均需经过QC检测,每一份材料附加检测费用。请注意,客户提供物品接收并通过QC之后生产才正式开始。

视频

暂无

文档

暂无

COA

您可以在我们的产品标签或包装上找到产品批号。