进一步了解 >> 我们的质量体系通过ISO 9001认证。这些产品是在我们先进的设施中严格控制下生成的。
SERVICES

细胞稳转株构建

载体家提供高性价比且短周期的细胞稳转株构建服务。我们的技术团队拥有资深经验,可为您量身定做个性化基因修饰的细胞株。根据实验目的、修饰位点和细胞株,我们可采用化学转染、电转染或者病毒转导的方法引入所需的DNA修饰。标准药筛过后,多克隆细胞群或者单克隆细胞株经传代、验证并交付您使用。所有使用细胞株均保证携带理想的基因型,无污染且经ATCC标准认证。

订购信息
细胞模型 制备原理 交付内容 价格(CNY) 周期
基因过表达 慢病毒转导 多克隆细胞群 ¥22,000起 9-15周 订购咨询
单克隆细胞株 ¥36,000起 12-20周 订购咨询
shRNA基因敲低 慢病毒转导 多克隆细胞群 ¥39,000起 8-13周 订购咨询
单克隆细胞株 ¥53,000起 11-18周 订购咨询
Tet系统基因诱导表达 慢病毒转导 多克隆细胞群 ¥25,000起 10-16周 订购咨询
单克隆细胞株 ¥40,000起 13-21周 订购咨询
基因敲除 CRISPR/Cas9质粒转染 单克隆细胞株 ¥42,000起 10-16周 订购咨询
CRISPR/Cas9慢病毒转导 单克隆细胞株 ¥49,000起 10-17周 订购咨询
基因敲入 CRISPR/Cas9质粒转染 单克隆细胞株 ¥70,000起 14-19周 订购咨询
点突变 CRISPR/Cas9质粒转染 单克隆细胞株 ¥64,000起 13-19周 订购咨询
细胞株类型

我们可构建的细胞稳转株包括:

  • 基因过表达细胞稳转株
  • shRNA基因敲低细胞稳转株
  • Tet系统基因诱导表达细胞稳转株
  • CRISPR细胞稳转株(包含基因敲除、基因敲入或点突变)
生产/质控

基因过表达

载体家生产的目的基因过表达细胞稳转株可以帮助您克服瞬时转染的表达效果不稳定问题。过表达细胞稳转株通过慢病毒转导制备,并且经过了标准的药物筛选步骤。目的基因的表达水平使用RT-PCR测定。细胞发货前的QC检验还包括无菌测试、支原体检测。根据客户需求,我们也可提供额外的QC检验,如Western blot和免疫组化试验。

shRNA基因敲低

载体家生产的shRNA基因敲低细胞株可用于需要目的基因的在细胞中被长期敲低的场景。为保证目的基因的高效敲低,靶细胞以分成三份的形式分别接受3个shRNA慢病毒载体转导,所有shRNA在选择时均经过评分判定。转导后经过RT-PCR验证的敲低效率最高的一组细胞将用以交付。此外,发货前的细胞也会经过无菌测试、支原体检测等的QC检验。

Tet系统基因诱导表达

载体家可以帮助您定制使用Tet系统诱导目的基因表达的细胞稳转株。细胞默认状况下目的基因只有极小的背景表达,但是经过诱导后可大量表达。此外,我们也可制备表达Ter调控蛋白的细胞稳转株(如表达rtTA,tTS/rtTA和Tet3G)。这类细胞可以用携带TRE驱动的目的基因表达质粒/病毒载体进行转染/转导,从而实现更灵活的实验设计和更可靠的Tet诱导表达效果。对于Tet-On细胞稳转株,目的基因的诱导表达效果经过RT-PCR验证。此外,发货前的细胞也会经过无菌测试、支原体检测等QC检验。

基因敲除

载体家可为您的目的基因制备基因敲除细胞株。使用CRISPR技术可以稳定地从靶细胞中敲除目的基因,即使用一对靶向目的基因的gRNA和Cas9表达载体共同导入靶细胞,从而在目的基因上造成两个切口。细胞尝试修复切口的过程将导致两个切口间的序列的大片段删除。切口在基因上的位置经过专门优化,以使基因片段被敲除后可最大程度地失活目的基因。

根据不同的细胞类型,我们选择CRISPR慢病毒载体或者质粒载体进行基因敲除。最终的细胞株将通过Sanger测序以确定目的基因靶区域被敲除。此外,发货前的细胞也会经过无菌测试、支原体检测等QC检验。

基因敲入

载体家可为您的目的基因的特定位点进行基因敲入并构建细胞株。该类型细胞株使用CRISPR技术,通过引入靶位点配对的gRNA、Cas9表达载体和打靶供体载体来实现基因敲入。打靶供体载体提供了HDR介导的基因敲入需要的DNA模板。

最终的细胞株将通过Sanger测序以确定对靶基因成功进行了基因敲入。此外,发货前的细胞也会经过无菌测试、支原体检测等QC检验。

点突变

载体家可制备针对目的基因进行一系列点突变的细胞稳转株。该类型细胞株通过引入靶位点配对的gRNA、Cas9表达载体和单链供体寡核苷酸(ssODN)。ssODN提供了HDR介导的点突变需要的DNA模板。

最终的细胞株将通过Sanger测序以确定对靶基因成功进行了点突变。此外,发货前的细胞也会经过无菌测试、支原体检测等QC检验。

COA

您可以在我们的产品标签或包装上找到产品批号。

常见问题解答

载体家的细胞稳转株经过标准的QC检验流程,包括无菌测试和支原体检测,以及细胞基因型的检测(取决于细胞类型)。对于基因过表达,shRNA基因敲低和Tet系统诱导表达的细胞稳转株,RT-PCR分别用于检测目的基因表达情况、目的基因失活情况和目的基因的诱导表达效果。而对于CRISPR细胞稳转株(基因敲除、敲入和点突变),Sanger测序用于检测靶区域的基因编辑效果。

除了以上提及的标准QC检测,根据客户需求,载体家还可以提供Western blot、免疫组化和Southern blot等检测试验。这些额外的检测只有在经过在相应的细胞稳转株的适用性评估后可以才可以被进一步选择。载体家不保证额外检测的效果,因为其中一些试验的结果取决于抗体质量和被测试系统的适合性(选择测试的细胞系)。

对于细胞稳转株构建服务,载体家的交付周期是指从启动项目到完成项目的时间。生产项目层面的完成是指细胞通过QC后并准备寄出的状态。交付周期不包括客户提供的物料(如细胞株、用于载体构建的模板DNA)的QC检验时长,以及细胞寄出后的运输时间。