LB培养基
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LB培养基

LB (Lysogeny Broth)培养基是一种主要用来培养细菌的营养丰富培养基(Rich media)。它的发明者Giuseppe Bertani在1951年一开始是用来做噬菌体实验(Bertani 1951),后来发展成为培养大肠杆菌(E. coli)的标准培养基,被广泛用于分子生物学实验,例如质粒扩增和重组蛋白制备等。LB培养基由酵母提取物(Yeast extract)、胰蛋白胨(Trytone)、NaCl和水配制而成。酵母提取物是将S. cerevisiae酵母裂解后,提取水溶性部分溶解物做成的干粉,提供重要的水溶性维生素(包括维生素B)、氨基酸、多肽和碳水化合物。胰蛋白胨是用牛蛋白casein的胰酶消化产物的干粉,提供氨基酸和多肽,是主要的氮源和碳源。氯化钠提供转运与渗透压平衡用的钠离子。至今,广泛使用的配方包括Miller’s、Lennox’s和Luria’s 。其中,Lennox’s和Luria’s 配方适用于盐敏感的抗生素,如Zeocin。

订购信息
产品描述

1 L LB培养基配方

  • 10 g 胰蛋白胨
  • 5 g 酵母提取物
  • 10 g NaCl
  • pH 7.0-7.2

1 L 低盐LB培养基(Lennox’s)配方

  • 10 g 胰蛋白胨
  • 5 g 酵母提取物
  • 5 g NaCl
  • pH 7.0-7.2

1 L 低盐LB培养基(Luria’s)配方

  • 10 g 胰蛋白胨
  • 5 g 酵母提取物
  • 0.5 g NaCl
  • pH 7.0-7.2

除菌处理

高压灭菌

运输条件

常温

存储温度

2-8°C

常见问题解答

LB 培养基是一种营养丰富的培养基,由胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl构成。胰蛋白胨是牛Casein的胰酶消化物,实际上就是氨基酸和多肽的混合物,可提供碳源和氮源。酵母提取物可提供维生素(包含维生素B)氨基酸、多肽、碳水化合物和微量元素。NaCl提供帮助运转和维持渗透压平衡的钠离子。

实验室常用于分子克隆的E. coli菌株都是K-12菌系衍生的。K-12菌株是维生素B合成缺陷型的。

LB 培养基不仅可以培养E.coli, 也可以培养多种类型的兼性菌(Facultative bacteria)。实际上,根据发明者G. Bertani的回顾,在开发的初期,LB培养基还用于优化志贺氏菌(Shigella)的培养及噬菌斑实验(Bertani 2004)。

自G. Bertani开发LB培养基以来,衍生了三种常用的LB培养基配方,分辨是LB Miller、LB Lennox和LB Luria,其中LB Miller是最常用的配方。三种培养基的差异是盐含量。Miller配方:10 g/L;Lennox配方:5 g/L;Luria配方:0.5 g/L。 

  • LB Miller:适用于一般细菌培养;
  • LB Lennox:适用于使用盐敏感的抗身素的细菌培养,如使用Blasticidin、Puromycin 以及Zeocin等;
  • LB Luria:适用于使用盐敏感的抗身素的细菌培养,亦常用于海洋生物身上的细菌如霍乱弧菌(Vibrio cholerae)的分离培养。
最初的Bertani配方是1%胰蛋白胨、0.5%酵母提取物、1% NaCl和0.1%葡萄糖,用1N NaOH调整pH至7.0。葡萄糖是等其他成分高压灭菌后添加的。时间久了,葡萄糖就从所有配方里摘除了。G. Bertani在他开发LB配方的时候,是印第安纳大学的Luria实验的成员。Ed Lennox也是Luria实验室的成员并且与Bertani一起参与早期的噬菌体实验。S. Luria在1955年的时候发表了一篇文章,摘抄了Bertani的LB配方。所以就被人们误认为LB是Luria Broth的缩写。LB Miller这个名字是来自于J. Miller在1972年发表的一本书Experiments in Molecular Biology中发布的配方,与Bertani培养基本一致,但是不含葡萄糖。Ed Lennox在1955年进行E. coli渗透压方面实验时候开发的一种配方,比原配方少一半NaCl,这个配方就是LB Lennox。第三个LB培养的盐含量最低,0.05% NaCl,被称为LB Luria。

使用LB培养细菌时,还会用到抗生素、X-Gal等试剂。在LB培养基中添加抗生素,常用于质粒的扩增。在LB琼脂平板添加X-Gal底物,常可用于蓝白筛选。

LB培养基最初为细菌的低细胞密度生长而设计开发。E. coli在LB培养基中的生长曲线包括延迟期、对数期、平台期和衰亡期4个阶段。对数生长,一段稳定生长的时间段,预计会在OD600(optical density at 600 nm)0.6到1.0之间结束。当OD600达到约2.0的时候,E. coli停止生长,此时每ml E. coli的干重达到0.6 mg。