hSpCas9 IVT mRNA

我们可制备无核苷修饰或N1-甲基假尿苷（m1Ψ）修饰的hSpCas9 mRNA。我们的hSpCas9 IVT mRNA经过试验验证，在体外细胞中可以高水平表达hSpCas9。

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试验验证

IVT cas9 validation.jpg

hSpCa9 IVT mRNA在体外的基因编辑效果

（A）向表达EGFP的HEK293T细胞转染打靶RGFP的gRNA以及经过N1-甲基假尿苷（m1Ψ）修饰的hSpCas9 IVT mRNA。（B）通过显微镜（100X）观察无转染的（NC）以及转染的两组细胞。（C）流式细胞术定量检测荧光强度。（D）转染后48或72 h，转染后的细胞相对NC减少了约40%的EGFP表达量。（E和F）基因编辑效果通过T7E1酶切（E）和Sanger测序确认（F）。高亮表示的腺嘌呤表明了在靶序列的插入突变。