VB UltraStable™ 化学感受态细胞
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VB UltraStable™ 化学感受态细胞

细菌在特定状态下可吸收环境中的DNA,这种状态称之为感受态(competence)。自然条件下的细菌吸收外源遗传物质可适应外界不良环境的影响,但并非所有类型的菌株均有此能力。大肠杆菌(E. coli)是实验室常用细菌类型。处于对数生长期的大肠杆菌更容易形成感受态。为了满足实验需求,人们通常使用理化方式诱导工程菌菌株产生感受态, 可以更有效地控制外源DNA的导入。常用转化方法有化学和电转两种(chemical transformation and electroporation)。对一般克隆实验来讲,化学转化实验操作起来更简易,不需要电转设备和耗材。

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产品描述

VB UltraStable 化学感受态细胞(chemically competent cells)产品中的阳离子(cation)能中和细胞膜表面负电荷与质粒DNA分子自带的负电荷,从而减少两者之间的互斥作用,让两者的接近更加容易。此外,被中和了的质粒DNA由于分子内缺少了负电荷排斥力,更倾向折叠成球型结构,而不是线性形态,更容易通过细胞膜。低温处理有助于降低细胞膜流动性,并使得膜表面的LPS(O-polysaccharide)整齐排列,让质粒DNA更容易附着于细胞膜。一旦DNA附着于膜表面,此时热激,细胞膜流动性增加,附着的质粒DNA分子进入细胞内。此时再次低温处理,细胞膜流动性再次降低,胞内的质粒DNA分子被锁住。

VB UltraStable 化学感受态细胞是一款经过优化的高转化效率产品,突变了合成LPS的galE基因,使其LPS变少,更容易捕获DNA,转化效率可达>108 cfu/ug。

特点

  • 适用于筛选和扩增含有重复序列的质粒,例如慢病毒载体、逆转录病毒载体和腺相关病毒载体。
  • 携带突变的recA基因,避免同源序列之间的重组。
  • 携带突变的endA基因,避免提取的质粒DNA含有核酸內切酶I污染。
  • 携带突变的fhuA基因,使该菌株抗噬菌体T1。
  • 有效转化真核来源的甲基化DNA,以及PCR、cDNA等来源的非基甲基化DNA(mcrA-, Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC))。
  • ccdB敏感型,适合Gateway克隆产物的转化。
  • 表达lacZ基因的omega片段,适合含有alpha片段的载体的蓝白斑筛选。

菌种类别

E.coli K-12

基因型

F’[∆ccdAB proAB+ lacIq lacZ∆M15 zzf::Tn10 (TetR)] recA1 endA1 fhuA mcrA ∆(mrr-hsdRMS-mcrBC) Φ80dlacZ∆M15 ∆(ara, leu)7697 araD139 ∆lacX74 galK16 galE15 e14- relA1 rpsL nupG (StrR) rph spoT1

运输条件

干冰

存储温度

-80°C

文档

使用说明书

VB UltraStableTM chemically competent cells