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APF LB培养基

APF LB培养基,是一种不含动物源成分(Animal Product Free)的工业级别LB培养基。20世纪80年代出现的牛海绵状脑病(BSE),被认为可通过食物传染人,引起了人们的关注。生物制药行业正在逐渐远离使用含有动物源成分的原材料,而转向使用不含动物源成分的原材料来提高产品的安全性。传统LB培养基是由胰蛋白胨、酵母提取物和NaCl配制而成,其中胰蛋白胨(Tryptone)是一种动物源性 (AO) 酪蛋白胰酶消化物。 APF LB培养基中使用了植物性的Tryptone替代物。实验证明,含有质粒的E. coli在APF LB培养基培养后,与使用传统LB培养基培养相比,细胞密度提高了,质粒产量更高,并且不同批次培养的表现更一致,适用于生物制药的研发和生产。

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产品描述

除菌处理

高压灭菌

运输条件

常温

存储温度

液体:2-8°C

干粉:室温 (18-25°C)

产品性能


图1. 相比传统LB培养基,4种K12菌株在APF LB培养基获得更高细胞密度

我们测试了实验室常用菌株在传统LB培养基和APF LB培养基的生长曲线。DH5α、DH10B、Stbl3和VB UltraStable™来自K12菌株,常用来扩增质粒。BL21和BL21(DE3)来自B菌株,常用来表达重组蛋白。过夜复苏这些菌株。针对某一种菌,等量接种至分别装有200 ml LB培养基和APF LB培养基的锥形瓶中,37℃,220 rpm,培养16 h,期间每隔2 h依次测量OD600值。测试的4种K12菌株在APF LB培养基获得更高细胞密度,测试的2种B菌种在2种培养基中的细胞密度没有显示出显著差异。我们推测这是由于B菌株具有更好的氨基酸合成能力(SH Yoon, 2012)。

图 2

图2. 与传统LB培养基相比,APF LB培养基的质粒产量更高

分别接种等量的含有高拷贝质粒(质粒大小~ 5 kb)的VB UltraStable菌株到200 ml含有抗生素的LB培养基和APF LB培养基中,37℃,220 rpm,培养48 h。期间,在不同时间点依次取出4 ml菌液,抽提质粒DNA,然后取1 ul 质粒DNA溶液跑琼脂糖电泳(1%琼脂糖),EB替代物染色。

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