强力霉素

强力霉素(Doxycycline)是第二代四环素,其毒性小于第一代四环素。虽然强力霉素是一种抗生素,但在基因工程领域的应用中,它常被用作诱导型基因表达系统Tet systems的诱导剂,目的基因的表达取决于强力霉素的存在(Tet-On)或不存在(Tet-Off)。在Tet-On系统中,向培养基中添加强力霉素会使rtTA蛋白构象变化,从而使rtTA与位于可诱导TRE启动子中的tet操纵子序列结合,激活下游目的基因的转录。在Tet-Off系统中,从培养基中去除强力霉素会使tTA与TRE启动子中的tet操纵子序列结合,从而导致目标基因的转录。强力霉素的使用浓度比四环素低100倍,诱导浓度范围为1 ng/ml~1 ug/ml。

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产品描述

有效成分

盐酸强力霉素(Doxycycline hyclate)

化学式

C22H24N2O8·HCl·0.5H2O·0.5C2H6O

分子量

512.9 g/mol

溶剂

PBS缓冲液,pH7.2

除菌处理

过滤除菌

内毒素水平

< 5 EU/mg

细胞培养测试

分别在含有Tet-On和Tet-Off系统的哺乳动物细胞系中验证了药效

运输条件

-20℃冰袋

存储条件

-20℃

强力霉素 vs. 四环素

Tet-Off系统对四环素和强力霉素都响应。但Tet-On系统仅响应强力霉素,不响应四环素(Atze et al., 2016)。我们建议您使用强力霉素,因为所需的工作浓度要低得多,强力霉素为0.01~1 ug/ml,四环素为1~2 ug/ml,两者均远低于细胞培养或转基因动物研究的细胞毒性水平。此外,强力霉素的半衰期(24小时)比四环素(12小时)更长。因此,对于Tet-Off系统,您可能更被tui'j使用强力霉素进行长期维护抗生素水平,而诱导实验阶段则切换至四环素。

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