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TB(Terrific Broth)培养基

TB (Terrific broth) 培养基是一种能显著提高细菌培养密度的培养基(Tartof & Hobbs 1987)。与LB培养基不同,TB培养基中的酵母提取物含量增加了近5倍,磷酸钾盐取代了NaCl,额外添加了甘油。甘油作为碳源,不像葡萄糖,不会代谢产生乙酸。磷酸钾盐提供pH缓冲能力。丰富的营养和稳定的pH环境让E. coli维持在一个比较长时间的对数生长期(Log phase),细胞密度提高,从而重组蛋白和质粒DNA产量增加(特别对于低拷贝和单拷贝的质粒)。

订购信息
产品描述

1 L  TB培养基配方

  • 12 g 胰蛋白胨
  • 24 g 酵母提取物
  • 4 ml 甘油
  • 100 ml 0.17 M KH2PO4/0.72 M K2HPO4
  • pH 7.0-7.2

除菌处理

高压灭菌

运输条件

常温

存储温度

液体:2-8°C

干粉:室温

常见问题解答

LB培养基只适用于细菌的低密度培养,而TB培养基是为高密度的细菌培养而开发的。与LB培养基不同,TB培养基中的酵母提取物含量增加了近5倍,磷酸钾盐取代了NaCl,额外添加了甘油。甘油作为碳源,不像葡萄糖,不会代谢产生乙酸。磷酸钾盐提供pH缓冲能力。丰富的营养和稳定的pH环境让E. coli维持在一个比较长时间的对数生长期(Log phase),细菌密度提高,从而提高质粒产量,对低拷贝或者单拷贝质粒的扩增尤其显著。TB培养基也能够提高重组蛋白产量。

尽管一些实验手册上会有表明增加抗生素选择压力可从菌液中分离出更多的质粒DNA,但对比实验表明,抗生素浓度对质粒产量没有影响,而培养基中的酵母提取物含量才是影响质粒DNA产量的主要因素。通过在LB中增加酵母提取物含量,也能取得与TB培养基的相近DNA产量(Wood et al., 2017)。

S.O.C.和2x YT都是比LB营养更丰富的细菌培养基,但是用途与成分比例与TB培养基并不相同,不能替代TB。S.O.C.与2x YT培养基使用的Tryptone对比酵母提取物的比例显著要高于TB。S.O.C.培养基加入了葡萄糖充当分解代谢抑制物(catabolite repressor)以减少细胞对其他碳源的分解,再加上低的NaCl的含量,因此S.O.C.培养基更适用于转化实验中感受态细胞在高温高盐热激环境后的恢复。2x YT 培养基则主要应用于噬菌体的培养,比LB稍微提升了Tryptone和酵母提取物含量有利于细菌在感染噬菌体后保持存活。对比TB,使用S.O.C.和2x YT培养E. coli不能明显提升细胞密度和质粒DNA产量。

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