我应该使用哪种药物筛选标记?

VectorBuilder提供了多种药物筛选标记,如嘌呤霉素(Puro),新霉素(Neo),潮霉素B(Hygro B)和杀稻瘟菌素(Bsd)。Puro比其他抗生素能更快、更均一地杀死非抗性细胞。因此,对大多数细胞而言,我们推荐使用Puro。然而,某些细胞会天然地对某些抗生素具有某种程度的抗性,或者即便含有抗性基因,一些细胞对某些抗生素也十分敏感。这时就需要对细胞进行不同的抗药筛选测试以找到最合适的标记类型和浓度。

常用抗生素工作浓度和药筛时间

抗生素 测试细胞 推荐工作浓度 推荐药筛时间
Puromycin 293T 1-2 ug/ml 3-5 天
Geneticin (G418) HT1080 500-1000 ug/ml 7-11 天
Blasticidin 293T 5-15 ug/ml 7-11 天
Hygromycin B 293T 100-200 ug/ml 5-7 天

注意:

a. G418应用于Neomycin抗性基因筛选

b. 传代细胞可加快Blasticidin筛选

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